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細(xì)胞培養(yǎng)無(wú)菌操作基本技術(shù)

點(diǎn)擊次數(shù)：12753 發(fā)布時(shí)間：2019/9/23 9:16:10

1.實(shí)驗(yàn)前，無(wú)菌室及無(wú)菌操作臺(tái)用紫外燈照射30-60分鐘滅菌，用70%酒精擦拭無(wú)菌操作臺(tái)面，并開(kāi)啟無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后，才可開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作，每次操作只處理一株細(xì)胞，以免造成細(xì)胞交叉污染，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái)，如需要繼續(xù)進(jìn)行下一個(gè)實(shí)驗(yàn)，則用70%酒精擦拭無(wú)菌操作臺(tái)面，再讓無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后，才可進(jìn)行下一個(gè)實(shí)驗(yàn)操作

2.無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔與寬敞，必要物品，如試管架，移液器或吸管頭等可以暫時(shí)放置，其它實(shí)驗(yàn)用品用完后應(yīng)及時(shí)移出，以利氣體流通，實(shí)驗(yàn)用品要用70%酒精擦拭后才能帶入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在操作臺(tái)中央無(wú)菌區(qū)域內(nèi)進(jìn)行，勿在邊緣非無(wú)菌區(qū)域操作

3.小心取出無(wú)菌實(shí)驗(yàn)用品，避免造成污染，切勿碰觸吸管與吸頭頭部或容器瓶口，不要在打開(kāi)的容器正上方操作實(shí)驗(yàn)，容器打開(kāi)后，用手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放在臺(tái)面上

4.工作人員應(yīng)注意自身的安全,必須穿戴實(shí)驗(yàn)衣與手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，對(duì)于來(lái)自人源性或病毒感染的細(xì)胞株應(yīng)特別小心，并選擇適當(dāng)?shù)燃?jí)的無(wú)菌操作臺(tái)(至少兩級(jí))，操作過(guò)程中，應(yīng)避免引起氣溶膠的產(chǎn)生，小心有毒性試劑，例如DMSO及TPA等，并避免尖銳物品傷人等

5.定期檢查下列項(xiàng)目，CO2鋼瓶?jī)?nèi)的CO2壓力，CO2培養(yǎng)箱內(nèi)的CO2濃度，溫度，及水盤(pán)是否有污染，無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)氣流壓力是否正常，定期更換紫外燈管及HEPA過(guò)濾器濾膜，預(yù)濾網(wǎng)（300小時(shí)/預(yù)濾網(wǎng)，3000小時(shí)/HEPA）

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司