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ELISA實驗之十八條通用法則

點擊次數:12588   發(fā)布時間:2022/5/7 11:03:10

 ELISA實驗操作所要求的條件是比較嚴格的,無論是對實驗的硬件條件還是對實驗的操作人員的技術要求,都是如此。小編給大家總結了一些在進行ELISA實驗時所要注意的一些問題,一起來看下吧!
 
    1.移液槍的準確性,誤差不能超過2%?捎盟碗娮犹炱竭M行確定。有業(yè)人員進行矯正。
 
    2.要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
 
    3.要在實驗1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩(wěn)定。
 
    4.實驗時,要使底物避光保存。
 
    5.用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
 
    6.吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
 
    7.將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
 
    8.液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
 
    9.溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
 
    10.洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
 
    11.洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可保存。
 
    12.底物是光敏感的,要在臨用現(xiàn)配。
 
    13.檢測,要打開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
 
    14.底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
 
    15.待檢樣品要澄清,否則會影響結果。
 
    16.溫浴時間應遵守試劑盒規(guī)定。
 
    17.應盡量做雙孔實驗,這樣才能數據的準確性。
 
    18.對結果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。
 
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